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PhyNexus PTV 92-20-19說(shuō)明書(shū)

C18 Mass Spectrometry PhyTip Columns

PhyNexus開(kāi)發(fā)了一種自動(dòng)化工藝，使用C18色譜柱和C4色譜柱對(duì)蛋白質(zhì)/多肽進(jìn)行脫鹽或“清理” ，以簡(jiǎn)化樣品制備，進(jìn)行質(zhì)譜分析（一次多96個(gè)）。當(dāng)使用手動(dòng)移液管進(jìn)行反相純化時(shí)，吸氣溶液中的背壓會(huì)給操作者帶來(lái)不便，并導(dǎo)致結(jié)果不一致。PhyTip色譜柱具有與自動(dòng)化相輔相成的一致性，易用性和可擴(kuò)展性，可實(shí)現(xiàn)清理。憑借蛋白質(zhì)結(jié)合的高容量和多功能性，PhyNexus C18色譜柱是開(kāi)發(fā)流體MALDI或LC-MS工作流程的適選擇。

由于PhyTip移液器吸頭柱的床尺寸和容量增加，C18色譜柱與其他色譜柱相比，極性和非極性分子的選擇性提高。這種較大的床尺寸將使捕獲的平衡推動(dòng)到增加量的捕獲產(chǎn)物。當(dāng)比較一些的C18的容量時(shí)，C18 PhyTip色譜柱的結(jié)合量是每毫升樹(shù)脂蛋白質(zhì)量的兩倍多，同時(shí)具有相當(dāng)?shù)幕厥章屎头秶?/span>

C18色譜柱比C4色譜柱更具疏水性，可提供出色的靈敏度和肽的結(jié)合。中等90Å和300Å孔均可用于肽和蛋白質(zhì)片段的差異選擇性。在C4和C18樹(shù)脂之間進(jìn)行選擇時(shí)，主要區(qū)別在于C4由于其較短的長(zhǎng)度和更接近極性二氧化硅基板而比C18稍微更具極性。因此，對(duì)于更多極性分子，C4樹(shù)脂的選擇性增加。

這些柱結(jié)合了多種蛋白質(zhì)和多肽大小。結(jié)合能力高，較小或更極性的多肽損失較少。在普通的質(zhì)譜兼容溶劑中回收樣品。此外，凝膠過(guò)濾柱可用于進(jìn)行快速且*自動(dòng)化的96次緩沖液脫鹽或緩沖液交換。

使用我們專有的雙流色譜 C18提示   完整的抗體結(jié)合和高終濃度。C18 PhyTip色譜柱兼容大多數(shù)8,12和96通道自動(dòng)化液體處理機(jī)器人，包括  Agilent Technologies，  Beckman Coulter，  Dynamic Devices，  Perkin Elmer，  Hamilton和  Tecan。

PhyNexus開(kāi)發(fā)了一種自動(dòng)化工藝，使用C18PhyTip®色譜柱對(duì)蛋白質(zhì)/多肽進(jìn)行脫鹽或“清理”，用于質(zhì)譜（MS）分析。PhyTip柱通過(guò)反相固相萃?。⊿PE）結(jié)合蛋白質(zhì)/肽，其利用長(zhǎng)碳鏈C18樹(shù)脂基于其疏水性捕獲和分離肽。

PhyTip色譜柱由C18樹(shù)脂組成，通過(guò)兩個(gè)薄的惰性玻璃料屏幕保留在移液器吸頭上。根據(jù)下游分析，PhyTip色譜柱可以在5μL床中使用90Å或300Å孔隙樹(shù)脂制成，并且可以處理高達(dá)200μL的溶液。PhyTip色譜柱通過(guò)雙流色譜處理肽，這是一種由控制體積和流速的液體處理器執(zhí)行的來(lái)回流動(dòng)的系統(tǒng)過(guò)程。

因此，該方法可用于清除中小規(guī)模的肽樣品（每次多96個(gè)），用于基質(zhì)輔助激光解吸電離（MALDI）或電噴霧電離（ESI）質(zhì)譜。自動(dòng)化過(guò)程的一部分。

PhyNexus MEA個(gè)人凈化系統(tǒng)的樣品處理

1.樣品制備成0.1％三氟y酸（TFA）濃度

2.用100μL100％乙腈（ACN）潤(rùn)濕4個(gè)循環(huán)

3.用100μL0.1％TFA平衡1個(gè)循環(huán)

4.用185μL樣品捕獲4個(gè)循環(huán)

5.用100μL0.1％TFA洗滌1個(gè)循環(huán)

6.用100μL70％ACN + 0.1％TFA洗脫4個(gè)循環(huán)

每個(gè)循環(huán)包括一次抽吸和一次排出，流速為1 mL / min。每個(gè)洗脫抽吸/排出步驟以4個(gè)增量進(jìn)行，暫停5秒，而所有其他抽吸/排出步驟以8個(gè)增量進(jìn)行，暫停30秒。該處理旨在模擬手動(dòng)移液，同時(shí)補(bǔ)償背壓。密封洗脫板以防止揮發(fā)性洗脫緩沖液在處理期間蒸發(fā)，并且將溶液真空脫氣以進(jìn)一步確?？諝獠贿M(jìn)入柱。

質(zhì)譜PhyTip色譜柱可用于這些機(jī)器人系統(tǒng)。